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外周血淋巴细胞培养基
补充说明：外周血淋巴细胞培养基
a******W 2015-03-03 21:58
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医生回答(2)
张晓云 主治医师 三甲
提问
外周血淋巴细胞培养基是一种实验室技术手段，用于在体外培养从血液中分离出来的淋巴细胞，以研究其功能和活性。
外周血淋巴细胞培养主要用于免疫学研究和某些疾病的诊断，如自身免疫性疾病、感染性疾病等。这些疾病可能涉及T细胞介导的免疫反应异常激活，导致过度产生自身抗体或对病原体的过度炎症反应。自身免疫性疾病可表现为多种症状，包括关节炎、皮疹、肌肉无力等；感染性疾病则有发热、疲劳、头痛等症状。
常用的检查方法包括全血细胞计数、流式细胞术分析以及针对特定病原体的检测，例如乙肝病毒标志物检测。针对不同原因引起的淋巴细胞增殖性疾病的治疗方法各异，例如慢性粒细胞性白血病患者可以使用甲磺酸伊马替尼片进行靶向治疗，而艾滋病患者则需要抗逆转录病毒药物治疗。
淋巴细胞培养结果需谨慎解读，避免误判病情，同时应确保操作环境无菌，以免干扰实验结果。
2024-03-24 03:56
举报欧澈轩 主治医师 三甲
提问
操作程序：
1 ．采血：用10:2肝素（10％）温润无菌注射器抽取外周血2ml（注意：消毒时需脱碘）。
2 ．种血：将注射器搓捏，使血样混匀，在无菌条件下，用7#针头垂直种血28-32滴（一般成年男子28滴，成年女子30滴，儿童32滴左右）至外周血培养基内。
3 ．培养：将培养瓶放入37℃恒温箱中培养68-72小时，培养期间注意观察培养液有无凝血、溶血或长菌的现象，可每天将培养液摇一摇，以便细胞可获得充分的营养，一般情况下可不摇。
4 ．制片：
加秋：在培养完成前2-3小时，加入浓度为20ug/ml的秋水仙素2-3小滴（7#针头竖滴）后，继续培养2-3小时。
离心：将培养液用吸管吸至离心管中（10ml离心管）2000转/分×10分钟，弃上清,留沉淀。
低渗：加入已预温至37℃的0.075mol/L 氯hua钾溶液约8ml，用吸管充分打匀，放入37℃水浴箱中，温育30分钟。
预固定：向离心管中加入现配的预温至37℃的甲醇、冰醋酸固定液（3:1）1ml左右，轻轻混匀，
置室温下5分钟，2000转/分×10分钟，弃上清,留沉淀。
固定：沿管壁缓慢加入现配的预温至37℃的新配固定液约8ml，轻轻混匀，然后2000转/分离心10分钟。加入固定液再次固定。
弃上清，用固定液将沉淀调成细胞悬液（不宜太浓，一般加固定液至0.5ml）在冰片上滴片，每张片上滴2滴。
烤片：立即放入75℃烤箱中烤片3小时。
2015-03-03 21:58
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