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杂交瘤细胞培养
补充说明:杂交瘤细胞培养
a******W 2014-11-07 09:40
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精选回答(1)
杂交瘤细胞通过无菌悬浮培养获得大量特异性的抗体。
杂交瘤细胞是将小鼠或人的骨髓瘤细胞与能产生特定抗体的B淋巴细胞融合得到的,这种细胞能够持续地合成和分泌特异性的抗体。在无菌悬浮环境中培养可确保细胞保持其特性,并有利于抗体的高效表达和收集。
若需要长期保存杂交瘤细胞,可以将其置于液氮中冷冻保存,以便随时取用。
在生产过程中应遵守严格的无菌操作规程,并监控培养条件以优化抗体产量。此外,在使用杂交瘤技术时还需考虑可能存在的专利风险以及相应的法律合规问题。
2024-01-06 10:26
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医生回答(1)
1.在HAT培养基[属于选择性培养基,含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶核苷(T)]中进行选择性培养,未融合的脾细胞因不能在体外长期存活而死亡;未融合的骨髓瘤细胞合成DNA的主要途径被培养基中的氨基蝶呤阻断,又因缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶(HGPRT),不能利用培养基中的次黄嘌呤完成DNA的合成过程而死亡。只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶,因此能在HAT培养基中存活和增殖。经过克隆选择,可筛选出能产生特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞,在体内或体外培养,即可无限制地大量制备单克隆抗体。
2.仅仅就“两个细胞的融合”而言有三种,有“瘤-瘤”型融合细胞、“瘤-B”型融合细胞、“B-B”型融合细胞。(实际上,还有未融合细胞、三细胞融合....等)
2014-11-07 09:40
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