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医生回答(1)

李朔校 主治医师 三甲

擅长:性病科

提问

【hpv检测试剂?】HPV检测时常用的试剂主要有组织提取液、扩增体系等。HPV即人乳头瘤病毒,分为高危型和低危型,感染后可引起多种疾病,如宫颈癌、外阴癌、尖锐湿疣等。临床上常用PCR技术进行HPV-DNA检测,其主要步骤为:①利用核酸酶将样本中的DNA打开缺口;②加入含有特异性引物的探针分子,使其中的缺口延伸;③当出现两条带荧光信号的产物时,则代表样本中存在HPV DNA,且结果呈阳性。
一、组织提取液
1.PCR反应体系:包括Taqman®聚合酶、dNTPs、耐高温的DNA聚合酶、缓冲液、去污剂以及退火温度恒温器等。
2.探针:包括杂交捕获探针和实时定量PCR探针。前者用于定性诊断,后者用于定量诊断。
3.逆转录试剂盒:包括反转录酶、随机引物、优化过的合成引物以及RNA酶抑制剂等。
4.蛋白表达分析系统:包括抗体、显色底物、终止溶液、终止液、洗板仪、微孔板及离心机等。
二、扩增体系
1.PCR管:每个PCR反应管至少准备5个以上,以备后续PCR验证或建立标准曲线使用。
2.热循环仪:用于PCR反应过程中的加热操作。
三、实时定量PCR试剂
1.荧光基团:包括FAM、HEQ、CY5、CY3、SYBR Green I等。
2.双通道探针:包括上游探针、下游探针、内参对照探针。
四、其他
除上述常见的HPV检测试剂以外,还需要根据实际需求来选择购买不同的辅助材料,比如聚丙烯酰胺凝胶电泳PAGG试剂、脱氧寡核苷酸探针DASO试剂、预处理试剂等。需要注意的是,在使用HPV检测试剂前应先对其进行质量控制,若发现试剂过期或损坏则不可继续使用。

2024-01-20 10:38

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