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如何做药敏试验
补充说明：如何做药敏试验
a******W 2014-10-13 16:45
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医生回答(2)
肖林 主治医师 三甲
提问
药敏试验可以通过使用药敏试验、培养基鉴定、药物敏感性测试、琼脂稀释法或微量肉汤稀释法等方法进行。由于药敏试验涉及微生物学检测，建议在临床微生物科医生的指导下进行。
1.药敏试验
药敏试验用于评估细菌对多种抗生素的敏感性和耐药性，以指导精准用药。通过将待测菌株接种于含不同抗生素的平板上，在适宜条件下培养，分析菌株生长情况来确定其对抗生素的敏感度。
2.培养基鉴定
培养基鉴定是利用特定的培养基筛选出目标微生物的过程，为药敏试验提供准确结果。使用预先配置好的选择性或鉴别培养基，在规定条件下孵育后观察并记录菌落形态、颜色等特征。
3.药物敏感性测试
药物敏感性测试旨在测定细菌对某种或几种特定抗生素的敏感程度，辅助诊断和治疗感染性疾病。实验室环境中，将纯化后的临床标本接种于无菌体外培养基中，添加特定浓度的抗生素，然后在恒温箱中培养一定时间后评估结果。
4.琼脂稀释法
琼脂稀释法是一种常用的定量药敏试验方法，可快速检测多种抗生素对细菌的抑制作用。将待检菌液与不同浓度的抗生素混合后涂布于固体培养基上，在适宜条件下孵育，测量抑菌圈直径大小判断敏感性。
5.微量肉汤稀释法
微量肉汤稀释法适用于多种细菌的药敏试验，能够高效地评估细菌对多种抗生素的敏感性。将待测菌悬液逐个加入一系列梯度浓度的抗生素溶液中，形成连续浓度梯度，然后在适宜条件下孵育，观察菌悬液是否出现浑浊现象。
进行药敏试验前，应确保样本采集正确且无污染，同时告知医生任何可能影响结果的药物使用情况。
2024-01-29 14:10
举报陆梓琛 主治医师 三甲
提问
药敏试验根据临床标准委员会（NCCLS）推荐的K-B琼脂法进行，药敏纸片选择中国生物制品鉴定所药敏纸片，试验所选择药物必须包括下列抗生素：氨苄西林（AMP），阿莫西林/克拉维酸（AMC），头孢噻吩（CFT），头孢噻肟（CTX），庆大霉素（GEN），萘啶酸（NAL），环丙沙星（CIP），四环素（TBT），利福平（RFA），复方新诺明（SMZ）。药敏结果判定标准按照NCCLs手册2005版。
1. 操作方法：
（1）将待检菌接种于普通营养琼脂平板，37℃培养16～18小时，然后挑取普通营养琼脂平板上的纯培养菌落，悬于3ml生理盐水中，混匀后与菌液比浊管比浊。以有黑字的白纸为背景，调整浊度与比浊管（0.5麦氏单位）相同。
（2）用无菌棉拭子蘸取菌液，在管壁上挤压去掉多余菌液。用棉拭子涂布整个M-H培养基表面，反复几次，每次将平板旋转60度，最后沿周边绕两圈，保证涂均匀。
（3）待平板上的水分被琼脂完全吸收后再贴纸片。用无菌镊子取药敏纸片贴在平板表面，纸片一贴就不可再拿起。每个平板贴5张纸片，每张纸片间距不少于24mm，纸片中心距平皿边缘不少于15mm。在菌接种后15分钟内贴完纸片。
（4）将平板反转，孵育18～24小时后取出，用游标卡尺测量抑菌圈直径，从平板背面测量最接近的整数毫米数并记录（附表6）。抑菌环的边缘以肉眼见不到细菌明显生长为限。有的菌株可出现蔓延生长，进入抑菌环，磺胺药在抑菌环内出现轻微生长，这些都不作为抑菌环的边缘。结果判断依据鉴定所药敏纸片判定标准。
2014-10-13 16:45
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