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血浆dna提取
补充说明:血浆dna提取
a******W 2014-08-14 16:23
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血浆DNA提取可以用于基因测序、基因检测和基因分析等应用中,以评估特定基因的表达状态。如果需要进行该操作,应确保所采集样本的质量符合要求,并在无菌条件下进行操作。
1.血浆DNA提取
血浆DNA提取是通过采集血液样本,分离出其中的游离DNA片段,然后使用特定的方法纯化、富集和定量其含量的过程。此步骤可用于获取外周血中循环肿瘤DNA(ctDNA),对于某些癌症或其他遗传疾病的诊断提供有价值的信息。该技术利用了癌细胞破裂后释放到血液中的DNA片段特性,这些片段通常携带有特定突变信息。
2.基因测序
基因测序是指对从患者体内获得的DNA样品进行碱基序列测定的一系列过程,包括样品制备、文库构建、上机测序以及数据分析等环节。该方法能够完整地展示目标区域内的所有遗传信息,从而帮助识别可能导致某种疾病发生的变异位点。通过对这些数据进行深入挖掘和解读,可为临床医生制定个性化诊疗方案提供依据。
3.基因检测
基因检测通常采用PCR扩增靶向区域并对其进行高通量测序,随后由专业人员对所得数据进行分析。该技术有助于发现可能引起特定健康问题的基因变异;例如,囊性纤维化或镰状细胞性贫血分别涉及CFTR和HBB基因的异常。通过早期诊断及干预措施如定期锻炼和营养管理,可显著改善这些遗传性疾病患者的预后。
4.基因分析
基因分析涉及从血液或其他体液中提取DNA,并使用PCR扩增目标区域。随后将产物送至专门实验室进行测序和数据分析。这种技术有助于鉴定特定基因是否存在突变或拷贝数变化等情况,进而辅助诊断多种遗传相关疾病。此外,在某些情况下还可用于评估个体对某些药物的反应可能性。
在接受血浆DNA提取前,应确保告知医生任何已知的出血倾向或其他相关医疗状况,以免影响结果准确性。在进行基因测序时,应注意保持良好的睡眠质量,避免剧烈运动和摄入含咖啡因食物,以减少潜在干扰因素。
2024-01-28 00:13
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1 吸20ul蛋白酶K加入2.0ml微量离心管底部。
2 加入200ul待提取的样品于微量离心管中。
3 加入200ul Buffer AL缓冲液于离心管中,旋涡15秒。
4 放入56℃水浴10分钟
5 离心5秒钟,以便离下附于管壁上的水珠。
6 加入200ul无水乙醇于离心管中,旋涡混匀15秒后,短暂离心。
7 小心地将上述混合液加入QIAamp管柱中,尽量不要溅到管壁四周并在下套一个2ml收集管,盖紧管帽后离心1分钟(6000g,8000转/分),然后丢弃下面的收集管,重新套上一个新的收集管。
8 加入500ul BufferAW1缓冲液于QIAmp管柱中,尽量不要碰到管壁,盖紧管帽后离心1分钟(6000g,8000转/分),然后丢弃下面的收集管,重新套上一个新的收集管
9 加入500ul BufferAW2缓冲液于QIAamp管柱中,尽量不要碰到管壁,盖紧管帽后离心3分钟(14000转/分,20000g)
10 丢弃下面的收集管,重新套上一个1.5ml微量离心管,最高速离心1min,以彻底除去BufferAW2。
11 QIAamp管重新套上一个1.5ml微量离心管,打开QIAamp管,加入200ul BufferAE缓冲液,室温静置5分钟,然后离心1分钟(8000转/分),取下洗脱后的1.5ml微量离心管,将收集到的DNA提取液经核酸测定仪测得DNA浓度及纯度,一20℃存放备用。
2014-08-14 16:23
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